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    產品名稱:表皮生長因子受體(EGFR)ELISA試劑盒

    產品規格:48T/96T

    產品貨號:LE-H4000

    產品報價:

    免費咨詢:0551-66107970

    發郵件給我們:737388448@qq.com

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    本試劑盒僅限于科研使用,請勿用于醫藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。

    嚴格按照實驗說明書操作,并佩戴一次性手套和口罩。

    以下文字為產品簡介,詳情以說明書為準,可QQ或聯系在線客服索取。

    訂購方式:

    陳經理 電話:15375214453(微信同號) Q Q:737388448

    檢測原理

    試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被抗體的微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

    樣品收集及處理方式
    1.  血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
    2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
    3.  細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
    4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
    5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

    試劑盒規格及配置

    名稱

    96孔配置

    48孔配置

    微孔酶標板

    12孔×8條

    12孔×4條

    標準品

    0.3mL*6管

    0.3mL*6管

    樣本稀釋液

    6mL

    3mL

    檢測抗體-HRP

    10mL

    5mL

    20×洗滌緩沖液

    25mL

    15mL

    底物A

    6mL

    3mL

    底物B

    6mL

    3mL

    終止液

    6mL

    3mL

    封板膜

    2張

    2張

    說明書

    1份

    1份

    自封袋

    1個

    1個

    自備儀器

    1.  酶標儀(450nm)

    2.  高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

    3.  37℃恒溫箱

    操作步驟

    1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

    2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

    3.  樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。

    4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

    5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用

    機洗板)。

    6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

    7.  每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

    結果計算

    繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。


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